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酶标板转子低速离心细胞制片方法

[导读]上海安亭科学仪器有限公司介绍酶标板转子低速离心细胞制片的方法。

白血病T淋巴细胞株为本实验室保存,小牛血清(杭州四季青生物工程材料有 限公司)、RPMI1640培养液(杭州吉诺生物医药技术有限公司)、载玻片(江苏飞舟玻塑有限公司帆 船牌)、瑞氏-姬姆萨染色液;细胞涂片离心机,酶标板转子低速离心机(湖南湘仪实验室仪器开发有限公司)。

细胞培养:细胞株培养于细胞培养基中,换液培养瓶中约一半液体传代,加入相近量的细胞培养基,置于细 胞培养箱中,待细胞培养室呈对数生长时备用。

细胞涂片制备与染色:收集上述细胞,置于上海安亭科学仪器有限公司TDL-50B低速离心机中800r/min离心5min,去上清液,加入PBS洗涤1次,然后调整细胞浓度为1×106mL,分别取等量的细胞进行3种方法制片。 直接涂片法,取20μL细胞悬液均匀涂布载玻片,然后置于室温干燥;细胞涂片离心机法取等量的细胞,然后加 200μL的PBS稀释,安装好载玻片加样500r/min离心3 min;采用上海安亭酶标板转子低速离心机法,先用透明胶带 固定载玻片上下端在酶标板上, 然后取 20 μL 细 胞悬液均匀涂布载玻片, 立即置于酶标板转子上 500 r/min 离心 3 min。 离心后取出载玻片置于室温 干燥,均加数滴甲醇固定,任其挥发干燥,然后瑞 氏-姬姆萨染色,干燥后显微镜下观察,CCD 拍照。

以上简要方法仅供参考。

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